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CpG甲基化BSP-PCR技術(shù)服務(wù)

BSPBisulfite Genomic Sequence)技術(shù)是提取的基因組DNA,經(jīng)過NaHSO3處理后,未甲基化CpG中“C”會轉(zhuǎn)換成“T”;而甲基化CpG中的“C”依然保持“C”,通過設(shè)計BSP引物,進行PCR擴增,測序,從而確定CpG中甲基化數(shù)目及位置。目前主要用于啟動子中CpG甲基化程度高低與基因表達之間的關(guān)系研究。

基本流程:

技術(shù)優(yōu)勢:

(1)?????? 本公司在未知基因啟動子克隆方面,具有豐富的經(jīng)驗。目前已完成了團頭魴、蜥蜴、菊花、香草、中國對蝦、三疣梭子蟹等眾多的物種基因啟動子調(diào)取工作,為分析CpG島以及CpG甲基化與表達調(diào)控研究打下基礎(chǔ)。

(2)?????? 目前,國內(nèi)外試劑盒C-T轉(zhuǎn)換試劑盒的效率與實際宣傳有一定差距,本公司對試劑盒進行了系統(tǒng)改進,使得C-T轉(zhuǎn)換效率達到99%以上。

(3)?????? BSP-PCR中最難的是引物的設(shè)計及優(yōu)化,本公司經(jīng)過多年的積累,在引物的設(shè)計方面具有極為豐富的經(jīng)驗。

客戶須知:

CpG甲基化BSP-PCR技術(shù)服務(wù)

周期

最終提供客戶資料

CpG甲基化BSP-PCR技術(shù)服務(wù)

14-21個工作日,視樣品和基因數(shù)目而定。

詳細實驗總結(jié)報告(包括基因組DNA提取、C-T轉(zhuǎn)換、PCR擴增、電泳、測序、BiQAnalyzer分析結(jié)果等)。

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案例

本實驗,首先通過啟動子克隆技術(shù)分別獲取甘肅鼢鼠和高原鼢鼠某基因上游的啟動子,通過http://www.urogene.org/cgi-bin/methprimer/methprimer.cgi在線尋找該啟動子的CpG區(qū)域,然后通過對BSP-PCR技術(shù)對不同海拔該基因啟動子甲基化程度進行分析,從中找到膚色變化與該基因啟動子甲基化程度的關(guān)系,部分實驗結(jié)果如下:

客戶提供:

樣品類型

組織樣本

細胞樣品

基因組DNA

樣品需要量

100 -200 mg

5-10×106

2.0 ug

取樣和保存環(huán)境

新鮮;-80℃凍存或存于組織保存液中

新鮮;-80℃凍存或存于組織保存液中

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運輸

杭州市內(nèi)干冰上門取樣;

外地客戶干冰快遞運輸。

杭州市內(nèi)干冰上門取樣;

外地客戶干冰快遞運輸。

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杭州市內(nèi)干冰上門取樣;

外地客戶干冰快遞運輸。

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*(經(jīng)本公司評估后,實驗沒有結(jié)果,不收取任何費用)

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